Año de 1504, Isabel I de Castilla muere en Medina del Campo a los cincuenta y tres años. Es la sucesora al trono su tercera hija, Juana, que en ese momento era princesa de Asturias, archiduquesa de Austria y duquesa de Borgoña por su matrimonio con Felipe de Habsburgo. Es llamada a reinar con el título de Juana I de Castilla.